Nhóm tác giả: Kiwako Mori, Toshihide Kurihara, Maki Miyauchi, Ayako Ishida, Xiaoyan Jiang, Shin-ichi Ikeda, Hidemasa Torii & Kazuo Tsubota .
Xuất bản 23/11/2018
Tỷ lệ cận thị toàn cầu ngày càng tăng đòi hỏi phải thiết lập các phương pháp điều trị chống lại sự tiến triển của tật khúc xạ này. Để khám phá các tác nhân có thể kiểm soát cận thị, chúng tôi đã sàng lọc 207 loại hợp chất tự nhiên và thuốc thử hóa học dựa trên hoạt động của yếu tố ức chế cận thị, protein phản ứng tăng trưởng sớm (Egr-1) trong ống nghiệm. Trong số các ứng cử viên, crocetin cho thấy khả năng kích hoạt Egr-1 cao nhất và phụ thuộc vào liều lượng.
Đối với phân tích in vivo, cận thị thực nghiệm đã được gây ra ở chuột C57BL/6 J 3 tuần tuổi với thấu kính −30 diop (D) trong 3 tuần. Động vật được cho ăn bằng thức ăn hỗn hợp hoặc bình thường chứa 0,003% (n = 19) và 0,03% (n = 7) crocetin trong quá trình gây cận thị. Độ khúc xạ và chiều dài trục được đo ở trẻ 3 tuần tuổi và 6 tuần tuổi bằng máy đo khúc xạ quang hồng ngoại và hệ thống SD-OCT. So với nhóm chứng (n = 14), nhóm sử dụng crocetin cho thấy sự thay đổi nhỏ hơn đáng kể về tật khúc xạ (−13,62 ± 8,14 so với +0,82 ± 5,81 D cho 0,003%, p <0,01, −2,00 ± 4,52 D cho 0,03%, p <0,01 ) và độ giãn dài trục (0,27 ± 0,03 so với 0,22 ± 0,04 mm đối với 0,003%, p < 0,01, 0,23 ± 0,05 mm đối với 0,03%, p < 0,05). Những kết quả này cho thấy rằng một yếu tố crocetin trong chế độ ăn uống có thể có tác dụng ngăn ngừa sự tiến triển của cận thị.
Tỷ lệ cận thị được báo cáo là đang gia tăng ở nhiều quốc gia trong 50 năm qua. Đã có báo cáo rằng cận thị nặng có thể gây suy giảm thị lực nghiêm trọng như cận thị bệnh lý. Điều tra các biện pháp phòng ngừa sự tiến triển của cận thị nói chung là một vấn đề quan trọng trong lĩnh vực nhãn khoa. Các biện pháp đối phó với việc kiểm soát cận thị bao gồm sử dụng atropine hoặc pirenzepine tại chỗ, đeo kính đa tròng và phẫu thuật chỉnh hình đã được báo cáo. Các tác nhân đường uống bao gồm các yếu tố chế độ ăn uống cũng có thể là ứng cử viên. Cho đến nay, một chất đối kháng adenosine 7-methylxanthine (7-Mx) đã được báo cáo là có tác động đến tiến triển cận thị ở trẻ em.
Mặc dù các yếu tố di truyền được biết là có ảnh hưởng lớn đến sự phát triển của mắt, nhưng mối tương quan tốt giữa các thành phần khúc xạ để mắt trở thành cận thị bị ảnh hưởng bởi các yếu tố môi trường như giáo dục, chế độ ăn uống, hoạt động thể chất và hoạt động ngoài trời. Trong môi trường ngoài trời, chúng tôi đã báo cáo rằng ánh sáng tím, tức là bước sóng ngắn trong vùng ánh sáng khả kiến, có tác dụng ức chế sự tiến triển của cận thị thực nghiệm ở học sinh và trẻ em cận thị cao ở người trưởng thành.
Trong số các gen liên quan đến cận thị khác nhau, protein phản ứng tăng trưởng sớm 1 (Egr-1) đã được chứng minh là được điều chỉnh tăng khi tiếp xúc với ánh sáng tím cả in vivo và in vitro. Egr-1 là một yếu tố phiên mã được biết đến như một tác nhân ức chế cận thị hoạt động trong cơ chế phản hồi cho sự phát triển của trục mắt. Việc loại bỏ gen đối với Egr-1 cho thấy sự kéo dài trục ở chuột với các tác động nhỏ bổ sung đối với độ sâu khoang phía trước và bán kính cong của giác mạc, và những thay đổi của thấu kính tinh thể có thể nhấn mạnh sự khác biệt nhỏ về tật khúc xạ. Do đó, Egr-1 có thể được coi là một dấu ấn sinh học để can thiệp điều trị cận thị.
Có hai loại cận thị thử nghiệm chính; cận thị do ức chế thị giác và cận thị do thấu kính âm tính. Bằng cách gây cận thị ức chế thị giác hoặc cận thị do thấu kính âm tính, tác động của các tín hiệu môi trường và thói quen ăn kiêng đối với sự phát triển cận thị có thể được nghiên cứu. Sự tức chế thị giác dẫn đến các kiểu hình cận thị tương đối yếu hơn ở chuột so với các thấu kính âm, đặc biệt là đối với sự kéo dài trục mà liều lượng đôi khi không đạt được ý nghĩa thống kê
Hình 1: So sánh các giá trị tương đối của kích hoạt Egr-1 ở các nồng độ crocetin khác nhau trong ống nghiệm. (a)Xét nghiệm crocetin được lặp lại với các nồng độ khác nhau. Lưu ý rằng một sự gia tăng đáng kể về mặt thống kê kích hoạt Egr-1 được quan sát ít nhất với 0,008 mg/ml. * p < 0,05. Thanh đại diện cho giá trị trung bình +/− tiêu chuẩn sai lệch. (b) Phân tích log-tuyến tính cho thấy mối tương quan tuyến tính đáng kể giữa nồng độ crocetin và giá trị tương đối của kích hoạt Egr-1 so với kiểm soát. Trục X là logarit chung âm của crocetin nồng độ trong DMSO (mg/ml)
Cận thị do ức chế thị giác dễ xử lý hơn so với cận thị do thấu kính âm vì thấu kính phải được giữ trong suốt và được làm sạch thường xuyên trong khi bộ khuếch tán vẫn bị mờ. Gần đây, chúng tôi đã báo cáo một mô hình cận thị do thấu kính gây ra ở chuột mạnh mẽ và có thể tái tạo với kính mắt gắn trên hộp sọ được thiết kế mới. Kết hợp với phép đo bằng chụp cắt lớp kết hợp quang học miền độ sâu tiêu cự lớn, mô hình chuột cận thị do ống kính gây ra cho thấy một kiểu hình quan trọng hơn so với các mô hình ức chế thị giác. Mô hình này cũng tái tạo hiệu quả điều trị của phương pháp điều trị bằng atropine tại chỗ đã được báo cáo trước đây trong các mô hình động vật và thử nghiệm lâm sàng khác.
Một cách can thiệp để ngăn chặn sự tiến triển của cận thị đang có nhu cầu lớn, và các hợp chất tự nhiên trong chế độ ăn uống sẽ an toàn và lý tưởng, đặc biệt là đối với trẻ em đi học. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã xác định được một yếu tố chế độ ăn uống gây ra mạnh mẽ hoạt động của Egr-1 bằng cách sử dụng xét nghiệm phóng viên dựa trên luciferase. Chúng tôi đã xác nhận thêm về tác dụng ức chế của tác nhân chống lại sự thay đổi cận thị trong mô hình cận thị do thấu kính được thiết lập gần đây.
Kết quả
Crocetin gây ra sự kích hoạt Egr-1 đáng kể trong ống nghiệm. Sử dụng dòng tế bào Egr-1-luc, 207 loại hợp chất tự nhiên và thuốc thử hóa học đã được kiểm tra. Ở lần sàng lọc ban đầu, 7 hợp chất cho thấy Egr-1 hoạt hóa nhiều hơn 2,5 lần so với dimethyl sulfoxide (DMSO) đối chứng âm tính không có hợp chất. Trong số tất cả các ứng cử viên và một phorbol kiểm soát tích cực 12-myristate 13-acetate (PMA)21, 75% hoặc độ tinh khiết cao hơn của chiết xuất trái cây dành dành có chứa crocetin A (sau đây gọi là crocetin) cho thấy khả năng kích hoạt Egr-1 cao nhất (Bảng bổ sung 1) . Thử nghiệm thứ cấp đối với crocetin được thực hiện với các nồng độ khác nhau (0,002, 0,004, 0,008, 0,016, 0,031, 0,063, 0,125 và 0,25 mg/ml) (n = 3 cho mỗi nồng độ). Kích hoạt Egr-1 với crocetin là 1,18 ± 0,12 lần đối với 0,002 mg/ml (p = 0,299), 1,45 ± 0,47 lần đối với 0,004 mg/ml (p = 0,230), 1,63 ± 0,19 lần đối với 0,008 mg/ml (p = 0,020), 1,83 ± 0,26 lần đối với 0,016 mg/ml (p = 0,013), 1,65 ± 0,68 lần đối với 0,031 mg/ml (p = 0,254), 2,01 ± 0,54 lần đối với 0,063 mg/ml (p = 0,058), 1,94 ± 0,30 lần cho 0,125 mg/ml (p = 0,012), 2,1 ± 0,48 lần cho 0,25 mg/ml (p = 0,036) (Hình 1a). Phân tích log-tuyến tính cho thấy sự kích hoạt có ý nghĩa thống kê của Egr-1 với cách thức phụ thuộc vào liều (p <0,001) (Hình 1b). Một sự điều hòa đáng kể của Egr-1 mRNA đã được xác nhận bằng PCR thời gian thực 18 giờ sau khi sử dụng crocetin (Hình 2)
Hình 2. Biểu hiện tương đối của Egr-1 mRNA đã được điều chỉnh lại bằng cách sử dụng crocetin. Biểu hiện Egr-1 được phân tích bằng PCR thời gian thực bổ sung crocetin vào các tế bào HEK293T. Sự gia tăng đáng kể biểu hiện Egr-1 mRNA đã được xác nhận 18 giờ sau khi sử dụng crocetin. * p < 0,05.
Sử dụng crocetin bằng đường uống đã ngăn chặn sự thay đổi cận thị trong một mô hình cận thị do ống kính gây ra ở chuột. Chow (thức ăn gia súc) chứa hợp chất crocetin ứng cử viên đã được kiểm tra với mô hình chuột bị cận thị do thấu kính. Động vật được cho ăn với thức ăn chow có chứa crocetin ở nồng độ bình thường hoặc ở hai nồng độ khác nhau (0,003% và 0,03%). Mắt được điều trị bằng thấu kính −30 diopter (D) cho thấy sự thay đổi khúc xạ lớn hơn đáng kể (−13,62 ± 8,14 D) so với mắt có thấu kính 0 D (+7,44 ± 3,04 D) ở động vật được cho ăn bằng thức ăn chow bình thường (p < 0,001, Hình. 3). Động vật được nuôi bằng thức ăn chow có chứa crocetin cho thấy sự thay đổi khúc xạ nhỏ hơn đáng kể với thấu kính −30 D (+0,82 ± 5,81 D cho 0,003%, −2,00 ± 4,52 D cho 0,03%) so với nhóm chow bình thường với −30 D (−13,62 ± 8,14 D) (p < 0,001 cho cả hai nồng độ, Hình 3). Mắt có thấu kính −30 D cho thấy mắt phát triển theo trục nhiều hơn đáng kể (0,27 ± 0,03 mm) so với mắt có 0 D (0,22 ± 0,02 mm) trong nhóm chow bình thường (p < 0,001, Hình 4). Nhóm chow crocetin cũng cho thấy sự thay đổi chiều dài trục nhỏ hơn đáng kể ở mắt với ống kính −30 D (0,22 ± 0,04 mm cho 0,003%, 0,23 ± 0,05 mm cho 0,03%) so với nhóm chow bình thường với ống kính −30 D (0,27 ± 0,03 mm) (p < 0,01 cho 0,003%, p < 0,05 cho 0,03%, (Hình 4).
Sử dụng crocetin bằng đường uống cho thấy sự ức chế sự thay đổi độ dài trục và khúc xạ trong mô hình cận thị ở chuột với hai nồng độ khác nhau, mặc dù không có sự khác biệt đáng kể giữa các nồng độ. Mắt bị cận thị với thấu kính −30 D cho thấy độ dày màng mạch giảm (−3,13 ± 1,40 µm) và mắt kiểm soát với thấu kính 0 D tăng (3,17 ± 3,03 µm) độ dày màng mạch so với đường cơ sở và những thay đổi này khác biệt đáng kể (p < 0,001) trong nhóm chow bình thường. Điều này chỉ ra rằng độ dày của màng đệm trong cận thị do ống kính gây ra trở nên mỏng trong khi độ dày của màng đệm thường tăng lên khi chuột lớn lên mà không cần bất kỳ sự can thiệp nào. Ngược lại, khi chuột được cho ăn thức ăn có chứa 0,003% crocetin, việc đeo thấu kính −30 D gây ra sự gia tăng (3,17 ± 4,93 µm) độ dày màng đệm. Khi chuột được cho ăn thức ăn có chứa 0,03% crocetin và đeo thấu kính −30 D, độ dày màng mạch tăng (3,36 ± 2,32 µm) đã được quan sát thấy. So với chuột được cho ăn thức ăn chow thông thường và được trang bị thấu kính –30 D cho thấy độ dày màng mạch giảm (−3,13 ± 1,40 µm), những con chuột được ăn thức ăn chow 0,003% và 0,03% crocetin cho thấy sự thay đổi tích cực về độ dày màng mạch có ý nghĩa thống kê (p < 0,001) (Hình 5). Bán kính cong giác mạc cho thấy không có sự khác biệt đáng kể giữa mỗi nhóm (dữ liệu không được hiển thị).
Thảo luận
Trong nghiên cứu này, chúng tôi tập trung vào Egr-117,22 như một yếu tố ức chế cận thị và thực hiện thử nghiệm sàng lọc trong ống nghiệm với thư viện yếu tố chế độ ăn uống sử dụng hoạt động Egr-1 làm chỉ báo. Trong số 207 hợp chất, crocetin cho thấy khả năng kích hoạt Egr-1 cao nhất và có ý nghĩa thống kê (Bảng bổ sung 1). Mặc dù cường độ khác nhau do sự khác biệt trong sản phẩm, nhưng việc kích hoạt Egr-1 phụ thuộc vào liều đã được xác nhận (Hình 1). Quá trình điều hòa lại mRNA của Egr-1 cũng được xác nhận đáng kể bằng PCR thời gian thực (Hình 2). Sau đó, chúng tôi đã kiểm tra tác dụng điều trị của crocetin đối với sự tiến triển cận thị trong cơ thể. Bằng cách sử dụng một mô hình cận thị do thấu kính ở chuột mà chúng tôi đã phát triển gần đây, những thay đổi về khúc xạ và độ giãn dài trục đã bị triệt tiêu bằng cách sử dụng crocetin đường uống (Hình 3 và 4).
Hình 3. Crocetin ngăn chặn sự dịch chuyển khúc xạ cận thị trong mô hình chuột bị cận thị do thấu kính. Mắt được điều trị bằng thấu kính −30 D cho thấy sự thay đổi khúc xạ lớn hơn đáng kể so với mắt có thấu kính 0 D ở động vật được cho ăn bằng chow bình thường (p < 0,001). Động vật được cho ăn thức ăn có chứa 0,003% crocetin cho thấy sự thay đổi khúc xạ nhỏ hơn đáng kể với thấu kính −30 D so với cùng điều kiện trong đối chứng (p <0,001). Động vật được cho ăn thức ăn có chứa 0,03% crocetin cho thấy sự thay đổi khúc xạ nhỏ hơn đáng kể với thấu kính −30 D so với cùng điều kiện trong đối chứng (p <0,001). Mức độ thay đổi khúc xạ không khác biệt đáng kể giữa 0,03% crocetin với thấu kính −30 D và 0,003% crocetin với thấu kính −30 D. (p = 0,548). ** p < 0,01, Thanh biểu thị giá trị trung bình +/− độ lệch chuẩn.
Egr-1 là một nhân tố phiên mã với ba miền ngón tay kẽm để liên kết DNA cụ thể theo trình tự thuộc họ gen sớm ngay lập tức. Phân tử này có liên quan đến quá trình nguyên phân tế bào, tăng sinh, biệt hóa và chết theo chương trình dưới dạng cách cư xử phụ thuộc vào ngữ cảnh. Nó cũng đã được báo cáo là đóng một vai trò trong việc kích hoạt khớp thần kinh và tạo điện thế dài hạn. Egr-1 được báo cáo là một yếu tố ức chế cận thị có thể ảnh hưởng đến sự phát triển của trục mắt, kèm theo những thay đổi của các cấu trúc mắt khác.
Quả Gardenia được sử dụng rộng rãi ở các nước châu Á như một chất tạo màu tự nhiên và là một loại thuốc thảo dược truyền thống của Trung Quốc vì chúng có tác dụng cân bằng nội môi, bảo vệ gan, giảm đau, chống viêm khớp, hạ sốt và hạ lipid máu. Geniposide, crocin và crocetin là các chất chuyển hóa thứ cấp chính trong quả và có nhiều tác dụng dược lý đối với các bệnh khác nhau. Crocetin là một apocarotenoid độc đáo với trục C20 và một nhóm carboxyl ở mỗi đầu. Các dẫn xuất crocetin chịu trách nhiệm cho màu cam hoặc đỏ của trái cây và là hai thành phần hoạt chất của loại thuốc thảo dược này. Trong các nghiên cứu trên động vật và con người, người ta đã chứng minh rằng crocetin thể hiện nhiều tác dụng dược lý, chẳng hạn như chất chống oxy hóa, hạ lipid máu, chống xơ vữa động mạch, chống viêm, chống tăng sinh, tác dụng bảo vệ thần kinh, cải thiện tình trạng kháng insulin, tác dụng tích cực đối với giấc ngủ và giảm mệt mỏi về thể chất và ngăn ngừa thoái hóa võng mạc. Trọng lượng phân tử của crocetin tương đối nhỏ so với các loại carotenoid khác. Crocetin có tác dụng chống oxy hóa mạnh ức chế tổn thương oxy hóa tế bào qua trung gian bởi các loại oxy phản ứng có nguồn gốc từ xanthine oxidase.
Crocetin đã được tiêu thụ như một sản phẩm tự nhiên và tác dụng tích cực của nó đối với sức khỏe đã được đề xuất như giảm mệt mỏi về thể chất và bảo vệ tim mạch. Về mặt ứng dụng cho các bệnh về mắt, crocetin và họ hàng của nó hiện đang được nghiên cứu. Trong số đó, tác dụng điều trị chống lại các tình trạng võng mạc đã được ghi nhận rõ ràng bao gồm tăng lưu lượng máu, ức chế tân mạch bệnh lý và bảo vệ khỏi tế bào cảm quang và thoái hóa tế bào hạch võng mạc. Dựa trên những phát hiện gắn kết này trong các mô hình động vật, các thử nghiệm lâm sàng đã tiến hành đã chỉ ra rằng việc bổ sung chế độ ăn uống có chứa crocetin làm tăng độ nhạy cảm của võng mạc ở bệnh nhân thoái hóa điểm vàng do tuổi tác. Crocetin dùng đường uống được ruột hấp thụ nhanh chóng và đi vào tuần hoàn máu, nơi nó tồn tại trong huyết tương dạng tự do nguyên vẹn hoặc ở dạng liên hợp glucuronide.
Nồng độ crocetin trong huyết tương đạt tối đa trong vòng 0,5 giờ sau khi uống ở chuột. Nồng độ thủy dịch xấp xỉ 2 µM sau 1,5 giờ sau khi uống, đây là mức đủ để giảm sự chết tế bào trong ống nghiệm do H2O2 hoặc tunicamycyn gây ra. Crocetin dùng đường uống ở nồng độ 100 mg/kg cho thấy hiệu quả đáng kể. Trong thí nghiệm của chúng tôi, chow hỗn hợp 0,003% tương ứng với 10 mg/kg cũng như chow hỗn hợp 0,03% tương ứng với 100 mg/kg cho thấy mức độ ảnh hưởng như nhau. Nồng độ tối thiểu của crocetin cho thấy mức kích hoạt Egr-1 tăng đáng kể về mặt thống kê so với đối chứng là 0,008 mg/ml (Hình 1a) tương ứng với 24,4 µM theo trọng lượng phân tử. Yamauchi et al. đã báo cáo rằng trong thí nghiệm trên chuột của họ, nồng độ crocetin trong huyết tương đạt 109,6 µM 4 giờ sau khi uống 100 mg/kg crocetin có cùng độ tinh khiết như trong thí nghiệm của chúng tôi. Trong thí nghiệm trên chuột của họ, nồng độ crocetin đạt 62,5 µM trong huyết tương và 2,0 µM trong thủy dịch 1,5 giờ sau khi uống 50 mg/kg crocetin. Vì nghiên cứu trong ống nghiệm của chúng tôi đã chứng minh rằng nồng độ 24,4 µM trong võng mạc là tối thiểu cần thiết để kích hoạt Egr-1, nên mức độ crocetin trong võng mạc có thể không đạt được sự phối hợp đủ trong một thời gian dài trong suốt quá trình uống. Do đó, về mặt kích hoạt Egr-1, các thí nghiệm in vivo có thể gây hiểu nhầm do sử dụng nồng độ thuốc quá thấp. Cần nghiên cứu thêm để biết chính xác hơn lượng crocetin đi vào võng mạc sau khi uống crocetin.
Hình 4. Crocetin triệt tiêu sự kéo dài trục trong mô hình chuột bị cận thị do thấu kính. Sự thay đổi độ dài trục của mắt do cận thị với thấu kính −30 D cho thấy sự phát triển theo trục của mắt nhiều hơn đáng kể so với mắt đối chứng có 0 D trong nhóm chow bình thường (p <0,001). Nhóm chow 0,003% và 0,03% crocetin cho thấy sự thay đổi chiều dài trục nhỏ hơn đáng kể ở mắt với ống kính −30 D so với nhóm chow bình thường với ống kính −30 D (p <0,001 cho 0,003%, p = 0,010 cho 0,03%, tương ứng ). Mức độ thay đổi của chiều dài trục không khác biệt đáng kể giữa 0,03% crocetin với thấu kính −30 D và 0,003% crocetin với thấu kính −30 D (p = 0,510). *p < 0,05, **p < 0,01, Thanh biểu thị giá trị trung bình +/− độ lệch chuẩn.
Để chứng minh cơ chế ức chế tiến triển cận thị, chúng tôi đã kiểm tra biểu hiện Egr-1 mRNA ở võng mạc bằng PCR thời gian thực, nhưng kết quả không nhất quán. Điều này có thể là do biểu hiện Egr-1 có thể thay đổi nhanh chóng với các kích thích bên ngoài khác nhau. Thời gian lấy mẫu nên được xem xét nhiều hơn để có được kết quả chính xác hơn. Crocetin đã được báo cáo là chất đối kháng thụ thể NMDA và việc kích thích thụ thể NMDA thường kích hoạt ngay lập tức các gen sớm. Trong nghiên cứu của chúng tôi, crocetin đã được chứng minh là làm tăng biểu hiện Egr-1 mRNA trong ống nghiệm một cách đáng kể ở thời điểm sau nhưng không sớm (Hình 2). Vì không có mối tương quan trực tiếp giữa biểu hiện Egr-1 võng mạc và quản lý crocetin được xác nhận như đã thảo luận ở trên, nên có thể có một cơ chế khác liên quan.
Hình 5. Việc giảm độ dày màng đệm đã giảm đi khi sử dụng crocetin. So sánh sự thay đổi độ dày màng mạch giữa mắt bị cận thị đeo kính −30 D và mắt đối chứng đeo kính 0 D cho thấy sự khác biệt đáng kể ở nhóm chow bình thường (p < 0,001). Những con chuột được cho ăn 0,003% và 0,03% crocetin chow với ống kính −30 D cho thấy sự thay đổi tích cực về độ dày của màng đệm với ý nghĩa thống kê (p <0,001). ** p < 0,01, Thanh biểu thị giá trị trung bình +/− độ lệch chuẩn.
Một cơ quan có thể được nhắm mục tiêu của crocetin để ức chế cận thị sẽ là màng mạch. Trong số các chức năng khác nhau, màng mạch được biết là điều chỉnh vị trí của võng mạc bằng cách thay đổi độ dày cho emmetropization. Độ dày màng mạch ở mắt cận thị mỏng hơn so với mắt bình thường, điều này có liên quan đến chiều dài trục ở người và mô hình động vật. Trong mô hình cận thị chuột do ống kính hiện tại cũng cho thấy màng đệm mỏng đi cùng với những thay đổi cận thị của khúc xạ và chiều dài trục. So với chow bình thường, việc cho ăn bằng crocetin đã ngăn chặn sự mỏng đi của màng đệm. So với chow bình thường, việc cho ăn bằng crocetin đã ngăn chặn sự mỏng đi của màng đệm. Cần có các nghiên cứu sâu hơn để kiểm tra xem hiệu ứng ức chế này có phụ thuộc vào biểu hiện Egr-1 hay không.
Trong những thập kỷ gần đây, tỷ lệ cận thị phổ biến đã tăng lên đáng kể trên toàn thế giới. Các nhà khoa học và bác sĩ lâm sàng hiện đang cố gắng khám phá và phát triển các cách để kiểm soát cận thị, đặc biệt là ở học sinh. Ngày nay, các hợp chất hóa học hoặc tiếp xúc với ánh sáng làm tăng hoạt động Egr-1 đã được báo cáo để ngăn chặn sự tiến triển của cận thị trong các mô hình động vật. Ngoài ra, nghiên cứu hiện tại của chúng tôi là nghiên cứu đầu tiên mô tả một crocetin chiết xuất tự nhiên như một tác nhân kiểm soát cận thị thông qua việc điều chỉnh lại Egr-1. Để đảm bảo hiệu quả của crocetin, một thử nghiệm đối chứng ngẫu nhiên trong tương lai trong môi trường lâm sàng là rất quan trọng và gần đây đã được đưa ra.
Tại Việt Nam, các nhà khoa học thuộc Viện Y học bản địa Việt Nam đã nghiên cứu ứng dụng Crocetin kết hợp bài thuốc y học dân tộc trong cải thiện thị lực học đường trẻ em từ năm 2016, đến 2020; Sau thử nghiệm thành công với kết quả cải thiện thị lực ở trẻ em cận thị tuổi học đường ấn tượng Viện đã chuyển giao sản xuất công trình nghiên cứu dưới dạng siro thảo dược và lưu hành thương mại với tên thương phẩm Myopic SAMAN – đôi mắt khỏe đưa trẻ tới trường.
